L'azoto è un gas ampiamente utilizzato nella produzione, insieme a una dozzina di altri composti inerti. Non è sempre consigliabile trasportare o immagazzinare questo gas nella sua forma pura, e talvolta è sufficiente determinarne la presenza nella sostanza. Per questo, viene utilizzato il metodo Kjeldahl. Il metodo Kjeldahl consiste nel fatto che l'azoto, contenuto nel liquido filtrato privo di proteine, viene convertito in ammonio durante la reazione di combustione con acido solforico. L'ammoniaca risultante viene rilasciata liberamente dopo una reazione alcalina.
Istruzioni
Passo 1
Per l'analisi, prendere 4 ml di sangue, plasma o siero, diluirlo con 8 ml di acqua distillata. Aggiungere 8 ml di acido tricloroacetico nello stesso pallone. Mescolare bene la soluzione e filtrare.
Passo 2
Nella beuta da distillazione, versare 5 ml del liquido filtrato, che di default conterrà 1 ml del sangue analizzato. Aggiungere 1 ml di reagente n. 2 lì, riscaldare il pallone a fuoco lento fino a quando non appare un vapore bianco.
Passaggio 3
Posizionare il pallone in modo che il suo fondo tocchi appena leggermente le fiamme. Il processo di combustione è considerato completo quando il liquido diventa bluastro o incolore.
Passaggio 4
Mettere da parte la fiaschetta a raffreddare. Basta un minuto e mezzo o due. Altrimenti, si forma un precipitato insolubile.
Passaggio 5
Versa l'acqua lungo il muro, risciacquando l'imbuto con essa. Agitare fino ad amalgamare, riscaldando il pallone se necessario.
Passaggio 6
Assemblare il dispositivo, collegare il ricevitore. Mettere 10 ml 0,01 N. nel ricevitore. soluzione di acido solforico. Aggiungi una o due gocce di metilroth. Dopo aver combinato tutti gli ingredienti, collegare la pompa a getto d'acqua al ricevitore.
Passaggio 7
Iniziare a far passare aria attraverso la preparazione, versare idrossido di sodio al 33% nella parte di distillazione, fino a quando il liquido diventa da incolore a blu scuro o marrone scuro. Questo indica una reazione alcalina.
Passaggio 8
Interrompere la distillazione dopo dieci minuti. Chiudere il rubinetto della pompa a getto d'acqua, aprire il tappo del ricevitore, sciacquare l'acido solforico dall'estremità del tubo di refrigerazione. Sostituire con un altro ricevitore con lo stesso volume di 0,01 N. soluzione di acido solforico, eseguire una seconda distillazione.
Passaggio 9
Aggiungere soda caustica al primo ricevitore fino ad ottenere un colore giallo stabile per 30 secondi.
Passaggio 10
Conclusione: 1 ml 0,01 N. acido solforico o idrossido di sodio corrisponde a 0,14 mg di azoto.
La differenza tra la quantità di acido solforico immessa nel ricevitore e la quantità di idrossido di sodio prelevata durante la titolazione, prodotta a 0,14 mg, è pari alla quantità di azoto residuo nel test 1 ml di sangue. Per mostrare la quantità di azoto in milligrammo percento, il risultato deve essere moltiplicato per 100.
